Éxito raro
Los investigadores pasaron tiempo asegurando que las enzimas que tenían estaban modificando la metilación como se esperaba, y que el desarrollo comenzó como de costumbre. Su hallazgo general es que las enzimas cambiaron el estado de metilación durante aproximadamente 500 bases a cada lado del sitio objetivo, y lo hicieron de manera bastante consistente. Pero hay siete sitios de impresión diferentes que deben modificarse, cada uno de los cuales controla múltiples genes cercanos. Entonces, si bien las modificaciones fueron consistentes, no siempre fueron lo suficientemente minuciosas como para dar lugar a los cambios esperados en todos los genes cercanos.
Esta eficiencia limitada apareció en la tasa de supervivencia. Comenzando con más de 250 embriones reprogramados que llevaban ADN de dos hombres, terminaron con dieciséis embarazos, pero solo cuatro que murieron al nacer, y tres vivos; Basado en otros experimentos, la mayor parte del resto murió durante la segunda mitad del desarrollo embrionario. De los tres vivos, uno era casi un 40 por ciento más grande que el cachorro típico, lo que sugiere problemas que regulan el crecimiento, murió el día después del nacimiento.
Los tres nacimientos vivos eran hombres, aunque los números son lo suficientemente pequeños como para que sea imposible saber si eso es significativo o no.
Los investigadores sugieren varias razones potenciales para la baja eficiencia. Una es simplemente que, mientras que la probabilidad de reprogramarse adecuadamente al menos uno de los sitios es alta, la reprogramación de los siete es considerablemente más desafiante. También existe el riesgo de efectos fuera del objetivo, donde la modificación tiene lugar en ubicaciones con secuencias similares a las dirigidas. También admiten que podría haber otras regiones clave impresas que simplemente no hemos identificado todavía.
Se necesitaría resolver eso si queremos utilizar este enfoque como una herramienta, que podría ser potencialmente útil como una forma de criar ratones que llevan mutaciones que afectan la viabilidad o la fertilidad femenina. Pero este trabajo ya ha sido útil incluso en su estado ineficiente, porque sirve como una validación bastante definitiva de nuestras ideas sobre la función de la impresión en el desarrollo embrionario, así como el papel crítico que juega la metilación en este proceso. Si no estuviéramos en gran medida sobre ambos, la eficiencia de este enfoque no sería baja, sería cero.
PNAS, 2025. DOI: 10.1073/PNAS.2425307122 (sobre DOIS).
